Kwalifikacja: CHM.04 - Wykonywanie badań analitycznych
Zawód: Technik analityk
Zawartość całkowitą białka oznacza się przy użyciu spektrofotometru w metodzie
Odpowiedzi
Informacja zwrotna
Odpowiedź biuretowa jest prawidłowa, ponieważ metoda ta opiera się na reakcji białek z odczynnikami biuretowymi, co prowadzi do powstania niebieskiego kompleksu, który można mierzyć spektrofotometrycznie. Metoda biuretowa jest szeroko stosowana w laboratoriach analitycznych do oceny całkowitej zawartości białka w próbkach biologicznych, takich jak surowica, osocze czy inne płyny ustrojowe. Zgodnie z normami, do przeprowadzenia analizy należy użyć standardów kalibracyjnych, co pozwala uzyskać dokładne i powtarzalne wyniki. Przykładowo, w przypadku analizy surowicy, stosując odczynniki biuretowe, można określić stężenie białka w zakresie od 0,1 do 5 g/dl, co jest szczególnie przydatne w diagnostyce klinicznej oraz w badaniach biochemicznych. Metoda ta jest również preferowana ze względu na jej prostotę, szybkość oraz dostępność odczynników.
W kontekście oznaczania zawartości białka, odpowiedzi takie jak wirówkowa, ksantoproteinowa czy ekstrakcyjna nie są właściwe z kilku kluczowych powodów. Metoda wirówkowa, chociaż często stosowana do rozdzielania komponentów próbki, nie jest techniką analityczną służącą do bezpośredniego pomiaru zawartości białka. Zamiast tego służy do oddzielania białek od innych składników, co eliminuje ich obecność w analizowanym roztworze. Z drugiej strony, metoda ksantoproteinowa polega na reakcji białek z kwasem azotowym, co prowadzi do powstawania związków barwnych jedynie w przypadku białek zawierających reszty tyrozynowe i fenolowe. Choć może być stosowana do wykrywania niektórych białek, nie jest używana do oznaczania całkowitej zawartości białka. Ekstrakcyjna metoda opiera się na rozpuszczaniu białek w odpowiednich rozpuszczalnikach, co również nie daje pełnego obrazu stężenia białka w próbce. Nieprawidłowe wybory związane z tymi metodami mogą wynikać z błędnego zrozumienia ich zastosowania lub niewłaściwego przyjęcia, że wszystkie techniki są równoważne. Właściwe zrozumienie różnic między tymi metodami oraz ich ograniczeń jest kluczowe dla uzyskania wiarygodnych wyników w analizach biochemicznych.