Eluent to ciecz lub mieszanina cieczy używana jako faza ruchoma w chromatografii. Jego zadaniem jest przemieszczanie składników próbki przez układ chromatograficzny i umożliwienie ich rozdzielenia.
W zależności od rodzaju chromatografii eluent może przepływać przez kolumnę, bibułę, płytkę chromatograficzną lub inne podłoże. Skład eluentu ma duży wpływ na szybkość przemieszczania się substancji oraz jakość rozdziału.
Skład eluentu
Eluent często przygotowuje się jako mieszaninę kilku rozpuszczalników w określonym stosunku objętościowym, np.:
eter naftowy : izopropanol : woda = 10:1,5:0,3
Taki zapis oznacza proporcje objętości składników, a nie ich masy ani stężenia procentowe.
Dlaczego skład eluentu jest ważny?
Dobór eluentu wpływa na:
- rozpuszczalność analizowanych substancji,
- oddziaływanie składników próbki z fazą stacjonarną,
- czas rozdziału,
- ostrość i rozdzielenie plam lub pików chromatograficznych.
Przykład obliczeniowy
Jeżeli 10 części eluentu stanowi 500 cm³ eteru naftowego, to jedna część wynosi:
500 cm³ / 10 = 50 cm³
Dla izopropanolu odpowiadającego 1,5 części:
1,5 × 50 cm³ = 75 cm³
Do przygotowania eluentu należy więc dodać 75 cm³ izopropanolu.
Wniosek
Przy sporządzaniu eluentu kluczowe jest poprawne odczytanie stosunku objętościowego i konsekwentne stosowanie tych samych jednostek objętości.