Spektrofotometr to przyrząd analityczny służący do pomiaru ilości światła pochłanianego przez badaną próbkę. W laboratoriach chemicznych wykorzystuje się go m.in. do oznaczania stężenia substancji barwnych lub takich, które po reakcji tworzą barwny produkt.
Zasada działania
Podstawowe elementy spektrofotometru to:
- źródło promieniowania,
- układ wyboru długości fali, np. filtr lub monochromator,
- kuweta z próbką,
- detektor światła, np. fotokomórka,
- układ pomiarowy i odczytowy.
Próbka pochłania część promieniowania. Im większe stężenie substancji absorbującej, tym zwykle większa absorbancja. Zależność tę opisuje prawo Lamberta-Beera, stosowane w analizie ilościowej.
Warunki prawidłowej pracy
Aby wynik był wiarygodny, spektrofotometr powinien być używany zgodnie z instrukcją producenta. Szczególnie ważne jest:
- stabilne zasilanie i nagrzanie aparatu przed pomiarem,
- stosowanie czystych i odpowiednich kuwet,
- wykonywanie pomiaru względem próby odniesienia,
- ochrona elementów światłoczułych przed przypadkowym oświetleniem.
W spektrofotometrach z fotokomórkami należy chronić fotokomórki przed bezpośrednim działaniem światła dziennego, ponieważ może ono zakłócić pracę detektora lub spowodować błędne wskazania.